羊肚菌供应商浅谈羊肚菌菌种分离(lí)技术
发布日期:2019-05-07
经(jīng)过我们多年(nián)生产实(shí)践栽培总结出(chū)来的经验是选用当年表现优异的羊肚(dù)菌子实体进行组织分离以(yǐ)后,再繁育出来的菌种进行(háng)栽培播(bō)种,由于转代次数少,变(biàn)异性概率低。再进(jìn)行播种(zhǒng),基本可以保障(zhàng)稳定的(de)出菇率。综上所(suǒ)述,掌握成熟的羊肚菌育种技术是必要的。以下(xià)为大家详细的(de)介绍羊肚(dù)菌菌种分离(lí)及提纯复(fù)壮技术:
一,选种(zhǒng)菇 正常(cháng)情(qíng)况在清晨还没有浇水之前采摘6分熟的(de),没有病害感染,虫害(hài)咬食的健康羊肚菌作(zuò)为种菇,还要(yào)看菇形与其母本(běn)的(de)外观形(xíng)态相似(sì)度越高越好。采菇以(yǐ)后不要带土装(zhuāng)入塑料袋中,根据不同品种写好标签。
二,种菇处理 将采(cǎi)到(dào)的种菇进(jìn)行(háng)测量,称(chēng)重,并做好详细记录(lù),测试种菇高,菌柄直径,菌帽(mào)直径(jìng),和菌帽高度。
三,准备工作 将制(zhì)备好(hǎo)的(de)PDA 培养(yǎng)基试管,无菌水,储水罐,酒精棉(mián),无菌棉(mián)摄子,酒精灯,火机,种菇(gū)等物品放到无菌操作台上(shàng),将杀菌灯开(kāi)好,无菌风机同时打开,20分钟后就可以进行分离羊肚菌菌种的操作了。也可以(yǐ)在接种(zhǒng)箱中进行,把上述物品全部放入(rù)接(jiē)种箱。接(jiē)种箱(xiāng)封(fēng)闭(bì)好以(yǐ)后(hòu)用二氯异(yì)氰悄酸纳薰蒸30分钟即可(kě)开始分离羊肚菌菌种的工作了。
四,分离菌种
1,带好手套,伸入无菌操作台的无菌(jun1)区,或接种箱内,先(xiān)用酒精棉球对双(shuāng)手手套外表进行彻(chè)底擦拭消毒,然后(hòu)用无菌(jun1)水对羊(yáng)肚菌(jun1)种菇进行冲洗冲洗过程的水(shuǐ)倒入储水罐中,内外都要冲(chōng)洗(xǐ),冲洗时间为2-3分钟,冲洗以后用无菌棉吸干(gàn)羊肚菌表面水分。然后将攝(shè)子用(yòng)酒精棉消毒(dú)处理以后,放在酒精灯火焰顺风方向燃烧消毒,再将羊肚菌(jun1)菌帽与(yǔ)菌(jun1)柄处掰断,将菇帽部分放到一(yī)边,只用菌柄部分,再拿起一支试(shì)管(guǎn)(试(shì)管和(hé)菌柄同时用左手拿好,在酒精(jīng)灯火(huǒ)焰顺(shùn)风处取下棉塞,棉塞(sāi)夹在右手中指和无名指(zhǐ)之间,注意塞入试管部(bù)分的棉(mián)塞(sāi)向外,不要与手接(jiē)触(chù),右手的拇指和食指拿摄子夹取(qǔ)菌柄与菌帽断开处的3毫米见(jiàn)方的一块羊肚(dù)菌组织,接入试(shì)管(guǎn)斜面培养(yǎng)基前(qián)端,塞(sāi)好(hǎo)棉塞(sāi),放在旁边(biān),注意始终保持试管培养基平面(miàn)向下,轻拿轻放。然后再进行下一(yī)支试管的操作(zuò)。
五,培养 将分离(lí)好的菌种贴好标签:标签(qiān)内容包括日期,品(pǐn)种(zhǒng)名称(chēng)等(děng)信息。然后就(jiù)可以放在20-23度的条(tiáo)件下恒温培养(yǎng)。注(zhù)意每(měi)天观察长势,杂菌感染严重(chóng)的及时挑出。感染轻微的可(kě)以(yǐ)保(bǎo)留(liú)进行(háng)提纯处理。
六,提纯 在(zài)分离的过程(chéng)中(zhōng),难免有杂菌感染,根据羊(yáng)肚(dù)菌(jun1)菌丝生长速度(dù)快的特(tè)点,即(jí)使有羊肚菌菌丝与杂菌(jun1)共(gòng)同萌发生长,经过三天培(péi)养,羊肚菌菌丝长(zhǎng)势会超过杂菌一大截,遇到这种情(qíng)况时就可以(yǐ)进行提纯处理:
1,准(zhǔn)备工作:准备提纯的菌种,空PDA试(shì)管培养基,酒精灯,酒精棉,接种(zhǒng)钩(gōu),火机(jī)。消毒处理和上述方法一致。
2,提纯流程
戴好手套(tào),用酒精(jīng)棉(mián)擦拭消(xiāo)毒,将接(jiē)种(zhǒng)钩擦拭消毒,然后在酒精灯火焰顺风方(fāng)向取下(xià)等待提纯菌种试管棉塞,用接种(zhǒng)钩在酒精灯火焰处灼(zhuó)烧消毒处理(lǐ)以后将原来接入的已(yǐ)经(jīng)感染杂菌的组织(zhī)块(kuài)部位的培养基一同(tóng)钩出试管,没有(yǒu)感染杂菌长有羊肚菌菌丝的培养基(jī)保留1-2厘米即可。注意接(jiē)种钩尽量不要接触(chù)到杂(zá)菌感染的部分。然后仔细对接种钩进行彻底消(xiāo)毒处(chù)理(lǐ)以后就可以取(qǔ)保留(liú)的羊肚菌纯菌丝接入新的PDA培养基中,大小以3毫米(mǐ)见方一块为宜。然后将提纯后的试管贴好标签(qiān),做(zuò)好记录。再放到20-23度进(jìn)行恒(héng)温培(péi)养。
七(qī),菌种保藏 分离(lí),提纯好的(de)羊肚菌菌种以(yǐ)后需要及时进行菌种保藏处(chù)理,具(jù)体请参照菌种保(bǎo)藏方法 在适当的季节进行(háng)出菇栽(zāi)培实验。
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